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雷竞技下载官方版 Phygene 10×快速转膜液(Rapid Transfer buffer)

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信息简介:雷竞技下载官方版 Phygene 10×快速转膜液(Rapid Transfer buffer)

详细信息:
“雷竞技下载官方版 Phygene 10×快速转膜液(Rapid Transfer buffer)”参数说明
是否有现货:
认证:
雷竞技下载官方版 Phygene
级别:
超纯、高纯
用途:
实验室
含量:
标准品
应用:
科学研究
型号:
PH0403
规格:
500ml
商标:
雷竞技下载官方版 Phygene
包装:
产量:
3124
“雷竞技下载官方版 Phygene 10×快速转膜液(Rapid Transfer buffer)”详细介绍
产品简介:

>>快速转膜液使用独特配方,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。使用湿转法(Tank blot)或半干转法(Semi-dry blot)方法,能在15-35分钟内完成转膜过程。

>>快速和环保:快速转膜液不使用甲醇,减轻了对实验者和环境的伤害。

>>兼容性好:快速转膜液能兼容Laemmli胶,预制胶,Bis-Tris胶等多种凝胶。

>>转移效率高:快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率,有效解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。
使用说明:

转膜前的准备:

5-6张裁好的滤纸;裁好的转印膜;足够的1×快速转移buffer

一 湿转法(Tank blot):

1 按照下表配制1×快速转膜液

——
1×快速转膜液配制量
100?ml
500?ml
1000?ml
10×快速转膜液
10?ml
50?ml
100?ml
无水乙醇
20?ml
100?ml
200?ml
超纯水
70?ml
350?ml
700?ml

2 将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。

3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。

注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。

4 按照以下顺序做好转印三明治结构:

负极(阴极)

一块海绵

2mm滤纸

凝胶

转印膜

1mm滤纸

一块海绵(根据三明治的厚度选择是否使用)

正极(阳极)

注意:?= 1 \* GB3 ① 要彻底清除三明治结构中的气泡,适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。

= 2 \* GB3 ② PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。

= 3 \* GB3 ③ 三明治结构的制作不能太紧,也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话,可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。

5 将三明治结构放于转移槽中。

注:转移槽中可以不用1×快速转膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)电泳缓冲液取代。三明治结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。

二 半干转(Semi-dry blot):

1 按照下表配制1×快速转膜液:

——
1×快速转膜液配制量
100?ml
500?ml
1000?ml
10×快速转膜液
10?ml
50?ml
100?ml
无水乙醇
20?ml
100?ml
200?ml
超纯水
70?ml
350?ml
700?ml

将滤纸浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。

3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。

注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。

4 按照以下顺序做好转印三明治结构:

负极(阴极)

下层滤纸

凝胶

转印膜

上层滤纸

正极(阳极)

半干转时,滤纸、胶、膜之间的大小,一般是下层滤纸>=膜>=胶>=上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触;滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。

注意:PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。

三 转移条件:

推荐使用恒流转移

电流
转移时间
300?mA
30?to?35?min
330?mA
25?to?30?min
350?mA
25?to?30?min
375?mA
20?to?25?min
400?mA
15?to?20?min
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

*Important Note:?This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

我们所提供的产品仅供科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或者化妆品等用途!